当患者因强直性脊柱炎相关症状就诊时，医生会根据体格检查、实验室检查、影像学检查等检查结果进行确诊。
其中体格检查包括脊柱检查，可发现脊柱弯曲度的改变以及肌肉改变；Schober试验可检查患者脊柱活动度的改变；4字试验可检查骶髂关节病变；胸廓扩张度检查及呼吸功能检查。
实验室检查可有病情活动的表现，包括贫血、血沉、C反应蛋白、血小板的改变。HLA-B27水平的测定最重要，有90%的患者可表现为阳性。
影像学检查以X线为主，骶髂关节病变表现为骶髂关节炎，当晚期累及髋关节可表现为骨性强直；脊柱病变表现为早期骨质疏松，晚期可出现竹节样脊柱。
