腰椎穿刺由浅入深经过的结构分别是皮肤、皮下的组织、浅筋膜、深筋膜、棘上韧带、棘间韧带、黄韧带，之后穿刺针穿刺硬脊膜以后达到蛛网膜，然后抽取脑脊液进行病变分析以及治疗。
腰椎穿刺，简称腰穿，是临床的一个基本操作。腰穿临床应用广泛，首先可以用于诊断，如：取脑脊液进行检验；测定颅压；进行脊髓或气脑造影。其次用于治疗疾病，如：放除脑脊液，降低颅内压力；用于血性脑脊液的引流；注射药物治疗炎症或肿瘤。
腰穿一般经由第3、4腰椎的间隙，也可以在第4、5腰椎间隙进行，采用局部的浸润麻醉，然后指导患者摆好体位，暴露穿刺部位进行操作。在腰穿前要进行凝血功能检查，确保患者凝血功能正常，避免椎管血肿形成，防止患者出现脊髓损伤。
另外，在患者手术结束后，需要去枕平卧6-8小时，避免低颅压性头痛情况出现。
